Laboratorio N1

UNIVERSIDAD LATINA DE PANAMA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

LICENCIATURA EN FARMACIA

MICROBIOLOGIA

PROFESOR

RICARDO VIZUETE

LABORATORIO N1

OBSERVACION DE BACTERIAS

INTEGRANTES

KAREN ATENCIO 8-961-397

LUIS CABALLERO 4-780-1815

JAIR DE FRIAS  7-712-2043

JACQUELINE GAN 8-969-487

MARLENIS GONZALEZ 8-885-653

JOICELINE JUSTAVINO 8-995-1541

JULISSA LIU 8-962-1420

YOVELIS NAVARRO 8-902 -1932

CARMEN PINZON 2-732-1836

IDA VERGARA 8-900-1483

BEATRIZ VILLARREAL 4-812-756

FECHA DE ENTREGA

LABORATORIO No. 1

Observación de bacterias

Introducción

Son técnicas que permiten observar microorganismos en función de la capacidad de los mismos para retener o no determinadas sustancias colorantes, lo que depende de la carga de la célula y del colorante.

Los colorantes pueden ser de distintos tipos:

➢ Catiónicos. Son sustancias que tienen carga positiva. Penetran en el interior de las células y las tiñen. Ejemplos: azul de metileno, cristal violeta, safranina.

➢ Aniónicos. Con carga negativa. No penetran en el interior celular, de modo que no tiñen las Células, sino el entorno. En este caso se habla de tinción negativa. Ejemplos: eosina, nigrosina.

➢ Liposolubles. Se mezclan con los lípidos celulares y los tiñen. Ejemplo: negro sudán.

Los microorganismos vivos o activos son por lo general incoloros (excepto algas y cianobacterias), por los que no se observarán con facilidad en un microscopio óptico de campo claro por la falta de contraste entre las células y el medio circundante, por lo que es necesario fijarlos y teñirlos en un frotis.

Bacterias del yogurt

El yogurt es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante.

Objetivos

➢ Realizar una tinción simple de bacterias procedentes de distintas muestras

naturales.

➢ Realizar dos tipos de fijaciones bacterianas y saber en qué casos se recomienda

una u otra.

➢ Observar la morfología bacteriana y aprender a distinguir los distintos tipos de

agrupaciones que existen.

➢ Practicar con el microscopio al máximo aumento y con el correcto empleo del

aceite de inmersión.

Materiales

-Mechero Bunsen o de alcohol

-Asa de siembra o aguja enmangada

-Pinzas

-Portaobjetos

-Muestras bacterianas de origen natural: yogur, vinagre, sarro dental, suelo, etc.

-Colorantes para tinción:

a) Solución de nigrosina o eosina 1%

b) Solución de safranina al 0,5%

c) Azul de metileno al 1%

-Microscopio y aceite de inmersión

Procedimiento

BACTERIAS DEL YOGURT

➢ Extensión: Realizar el frotis disolviendo una mínima porción de yogur en una pequeña gota de agua.

➢ Fijación Fijar con metanol o Xilol para eliminar parte de la grasa.

➢ Teñir Apoyar el portaobjetos sobre el soporte de tinciones y añadir unas gotas de azul de metileno o con un colorante cualquiera de los arriba indicados durante 4-5 minutos.

➢ Lavar con agua destilada

➢ Secar. pasar el portaobjetos varias veces por encima de la llama del mechero de alcohol, sin permitir que llegue a hervir, hasta que se seque.

➢ Añadir una gota de glicerina y colocar el cubreobjetos

➢ Observar primero con el objetivo 40×; luego se añade aceite de inmersión y se observa con el objetivo 100×

Resultado

Bacterias de yogurt Yoplait

Procedimiento

BACTERIAS DEL SARRO DENTAL

• Con una aguja enmangada tomar una pequeña porción de sarro dental y disolverla en una gota de agua sobre el portaobjetos.
• Dejar secar y fijar con calor.
• Teñir 2-3 minutos, lavar el exceso de colorante y secar.

Procedimiento

Uvas fermentadas

➢ Teñir Apoyar el portaobjetos sobre el soporte de tinciones y añadir unas gotas de azul de metileno o con un colorante cualquiera de los arriba indicados durante 4-5 minutos.

➢ Lavar con agua destilada

➢ Secar. pasar el portaobjetos varias veces por encima de la llama del mechero de alcohol, sin permitir que llegue a hervir, hasta que se seque

Preguntas de investigación

1. ¿Cuáles son las distintas formas y asociaciones que pueden presentar las bacterias? Explícalas y haz un dibujo esquemático de cada una de ellas.

4Resp. El yogur es un producto lácteo producido por la fermentación natural de la leche. A escala industrial se realiza la fermentación añadiendo a la leche dosis del 3-4% de una asociación de dos cepas bacterianas: el Streptococcus termophilus, poco productor de ácido, pero muy aromático, y el Lactobacillus bulgaricus, muy acidificante. En esta preparación se podrán, por tanto, observar dos morfologías bacterianas distintas (cocos y bacilos) y un tipo de agrupación (estreptococos, cocos en cadenas arrosariadas). Además, el tamaño del

lactobacilo (unos 30µm de longitud) facilita la observación, aunque no se tenga mucha práctica con el enfoque del microscopio.

• Extensión: Realizar el frotis disolviendo una mínima porción de yogur en una pequeña gota de agua.
• Fijación Fijar con metanol o Xilol para eliminar parte de la grasa.
• Teñir Apoyar el portaobjetos sobre el soporte de tinciones y añadir unas gotas de azul de metileno o con un colorante cualquiera de los arriba indicados durante 4-5 minutos.
• Lavar con agua destilada
• Secar. pasar el portaobjetos varias veces por encima de la llama del mechero de alcohol, sin permitir que llegue a hervir, hasta que se seque.
• añadir una gota de glicerina y colocar el cubreobjetos
• Observar primero con el objetivo 40×; luego se añade aceite de inmersión y se observa con el objetivo 100×

2. Enumera 5 las diferencias entre las bacterias y otros tipos de células. El yogur es un alimento más fácilmente digerible que la leche, ¿por qué?

Resp. Es debido a que los cultivos de bacterias que contiene el yogur rompen las cadenas de lactosa y la hacen más fácil de digerir. el proceso de hacer yogur también modifica las proteínas de la leche haciéndolas más digerible.

Características	Procariotas	Eucariotas
Tamaño	de 0,5 micras a 2 micras	de 2 a 200 micras
membrana nuclear	sin membrana. No hacen mitosis	Con membrana. Hacen mitosis
Orgánulos	Ribosomas y mesosomas	Ribosomas, mitocondrias, vacuolas, etc. sin mesosomas
ADN	Una molécula. Sin cromosomas	De una a varias moléculas. Forman cromosomas
Movimiento	Flagelos de estructura simple	Cilios y flagelos de estructura compleja
Pared celular	Delgada y de peptidoglicano	Sólo la presentan los vegetales (celulosa), los hongos (quitina)

3. En casos de intolerancia a la lactosa, ¿qué alimento será más fácilmente tolerado, la leche o el yogur? ¿Por qué?

Resp. El yogur, porque es un derivado de la leche y se elabora mediante la fermentación bacteriana de leche que transforma a los azucares en ácidos, así la lactosa se convierte en ácido láctico. El menor contenido de lactosa del yogur con respecto a la leche, hace que sea mejor tolerado por quienes no consumen leche habitualmente y, además, permite comenzar a tolerar la lactosa.

4. ¿Qué papel desempeña cada una de estas bacterias en la formación del yogur a partir de la leche?

Resp. Tanto Lactobacilos bulgaris como Streptococcus thermophilus realizan la fermentación del ácido lactico. Transforman los azucares presentes en la leche (lactosa formada por glucosa y galactosa) en ácido lactico. se trata de un proceso anaeróbico que confiere acidez al yogur.

5. ¿Qué otros procesos conoces en que se empleen bacterias para la elaboración de algún producto alimenticio?

Resp.

Proceso	Organismo	Papel en proceso	molécula original	Producto final
Fabricación de la cerveza	Saccharomyces cerevisidae(levadura)	Fermentación alcohólica y carbonatación	Glucosa i/o fructosa	Etanol +CO2
F. del pan	S. cerevisidae	Fermentación y carbonatación	Azúcar	Co2
F. del vinagre	Bacterias del ácido acético	Oxidación aerobios estrictos	Alcohol (etanol)	Ácido acético

Conclusión  

En este primer laboratorio hemos aprendido las técnicas de tinción en bacterias que se encuentran en nuestros alimentos y hemos elegidos al yogurt y uvas fermentadas con la ayuda de la levadura para acelerar su proceso, además de una muestra de sarro dental de nuestros compañeros.

Durante el proceso pudimos observar las diferentes formas que tiene las bacterias.